Вести науки

Гепатоцеллюлярная карцинома (HCC) является третьей по значимости причиной смертности от рака во всем мире, и считается, что микроРНК (miRs) выполняют важные функции в патогенезе HCC, регулируя экспрессию специфических генов-мишеней. Данное исследование было проведено для изучения роли miR-199 и его предполагаемого целевого , Х-бокс-связывающего белка 1(XBP1) в HCC, а также нижестоящего гена циклина D.

Уровни экспрессии miR-199, XBP1 и циклина D были обнаружены в клинических образцах HCC. Влияние miR-199 на регуляцию пролиферации клеток HCC и его основной механизм исследовали на клетках Hep3B2.1–7 с помощью анализа экспрессии и измерения пролиферации клеток (с помощью набора для подсчета клеток 8-и 5-этинил-2′ -дезоксиуридин и DAPI (двойное окрашивание)) в сочетании с экспериментами по усилению и потере функции.

Экспрессия XBP1 и циклина D была значительно увеличена в тканях HCC по сравнению с соседними тканями, не содержащими HCC, тогда как экспрессия miR-199 была снижена. Экзогенный miR-199 значительно подавлял экспрессию XBP1 и циклина D в клетках Hep3B2.1–7. Однако экспрессия XBP1 и циклина D значительно повышалась при лечении ингибитором miR-199. Соответственно, клетки Hep3B2.1–7, ко-трансфицированные с репортерной плазмидой дикого типа (нетранслируемая область (UTR) -WT XBP1-3) и экзогенный miR-199, проявляли более низкую относительную активность фермента люциферазы, чем клетки, ко-трансфицированные с отрицательным контролем miRNA и XBP1-3'UTR-WT, в то время как клетки, ко-трансфицированные мутированной плазмидой (XBP1-3'UTR-MU) и miR-199, не показали изменений. 

Было отмечено, что подавление XBP1 с помощью небольшой интерферирующей РНК значительно снижает экспрессию циклина D в клетках Hep3B2.1–7. Кроме того, экзогенный miR-199 уменьшал пролиферацию клеток Hep3B2.1–7, что противоречило действию ингибитора miR-199. В заключение было продемонстрировано, что miR-199 негативно регулирует экспрессию XBP1 путем непосредственного связывания с его 3'UTR и что XBP1 влияет на экспрессию циклина D, которая была связана с регуляцией клеточного цикла в клетках Hep3B2.1-7. Эти данные позволяют предположить о том, что путь miR-199 / XBP1 / cyclin D может играть важную роль в патогенезе HCC.

Таким образом представленное исследование является первым, которое продемонстрировало, что низкая экспрессия miR-199 была связана с HCC и что основной механизм mir-199 включал прямое подавление XBP1. Это может обеспечить новую теоретическую основу для понимания молекулярных механизмов HCC, а также новые цели для лечения HCC, разработки биомаркёров и лекарственных средств.