Несколько прогностических биомаркеров ответа на специфические ингибиторы стали обязательными для терапевтического выбора при немелкоклеточном раке легкого. У большинства пациентов с раком легкого биологические материалы, доступные для морфологической и молекулярной диагностики, представляют собой исключительно цитологические образцы, и при этом требуется минимальная потеря опухоли. Мультиплексная флуоресценция гибридизации in situ (mFISH) для одновременного обнаружения перегруппировки ALK- и ROS1-перегруппировки на одном слайде может быть полезна в клинической практике для сохранения цитологических образцов для дальнейшего молекулярного анализа. 

Цель: В представленном исследовании оценивалась диагностическая эффективность метода множественной флуоресценции ALK / ROS1 in situ гибридизации (FISH) в цитологических сериях аденокарциномы легких по сравнению с классическими зондами с одним разрывом.

Методы. Была собрана серия из 61 цитологического образца аденокарциномы легких, пораженных опухолями, несущими реаранжировку ALK- и реаранжировку ROS1- . Статус ALK и ROS1 ранее оценивался с помощью классического теста FISH с использованием зондов с единичным разрывом и иммуногистохимии. Исследуемая  популяция состояла из 6 ALK- положительных, 2 ROS1-положительных и 53 ALK / ROS1- диких типов. Все образцы были проанализированы мультиплексным FISH-анализом с использованием FlexISH ALK / ROS1 DistinguISH Probe Zytovision.

Результаты. Тестирования двойного зонда ALK / ROS1 FISH полностью соответствовали результатам предыдущих тестов одиночного ALK и ROS1 FISH на двух разных предметных стеклах. 6 ALK -положительных и 2 ROS1-положительных были подтверждены с помощью мультиплексного FISH-теста без ложноположительных и ложноотрицательных результатов. Результаты мультиплексного теста ALK / ROS1 mFISH совпали с результатами окрашивания иммуногистохимического анализа.

Заключение. Мультиплексный тест с зондом ALK / ROS1 FISH является полезным инструментом для одновременного обнаружения реаранжировки ALK и ROS1 на одном слайде в цитологических образцах с небольшим количеством биоматериала.
 

Multiplex fluorescence in situ hybridisation to detect anaplastic lymphoma kinase and ROS proto-oncogene 1 receptor tyrosine kinase rearrangements in lung cancer cytological samples | Journal of Clinical Pathology (bmj.com)
Zito Marino F, Rossi G, Cozzolino I, et al Multiplex fluorescence in situ hybridisation to detect anaplastic lymphoma kinase and ROS proto-oncogene 1 receptor tyrosine kinase rearrangements in lung cancer cytological samples Journal of Clinical Pathology 2020;73:96-101.